Elisa：加顯A顯B回放

以下是關于ELISA試劑盒中顯色液A和B液的詳細說明：

一、主要成分與作用

顯色液A（過氧化氫溶液）?

主要成分為H?O?，作為受氫體參與HRP（辣根過氧化物酶）催化反應，生成活性氧中間體?。

顯色液B（TMB溶液）?

主要成分為四甲基聯苯胺（TMB），作為供氫體（DH?），與HRP催化產生的活性氧反應生成藍色陽離子自由基，終止后變為黃色?。

二、反應機制

HRP催化反應?：

HRP + H?O? → HRP-活性氧復合物

HRP-活性氧復合物 + TMB → 藍色產物 + HRP

終止液（如硫酸）加入后，藍色產物轉化為黃色?。

三、操作注意事項

添加順序?

需先加A液（H?O?）后加B液（TMB），以確保HRP充分催化H?O?生成活性氧，再與TMB反應?。

穩定性?

TMB顯色液需現配現用（2小時內），避免氧化失效?。

操作時需戴手套，避免皮膚接觸（TMB為潛在致癌物）?。

四、其他底物對比

酶類型顯色液A顯色液B產物顏色

HRPH?O?TMB/OPD藍→黃

AP緩沖液PNP（對硝基苯磷酸酯）黃（405nm）

GOD葡萄糖對硝基藍四氮唑藍沉淀?

五、常見問題

顯色異常?：若終止液含還原劑，可能導致藍色產物褪色?。

替代方案?：OPD可作為TMB的替代顯色劑，但毒性更高?。

注：以上資料僅供參考，不作為實際數據，如需其他請咨詢技術老師或品牌供應商。

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