Elisa實(shí)驗(yàn)：稀釋標(biāo)準(zhǔn)品實(shí)驗(yàn)步驟回放

　　一、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋前準(zhǔn)備?

　　試劑與耗材?

　　7支空白EP管(編號(hào)S0-S6)

　　標(biāo)準(zhǔn)品樣本稀釋液(如1x PBS或說(shuō)明書(shū)指定緩沖液)

　　渦旋振蕩器、移液器(建議10-100μL和100-1000μL規(guī)格)

　　標(biāo)準(zhǔn)品活化?

　　凍干標(biāo)準(zhǔn)品需先離心1-2分鐘使粉末集中管底

　　加入指定體積蒸餾水(如200μL)，渦旋混勻5秒，靜置10-30分鐘至溶解

　　二、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋步驟?

　　初始稀釋?

　　在S6管中加入500μL標(biāo)準(zhǔn)品樣本稀釋液

　　吸取溶解后的標(biāo)準(zhǔn)品母液500μL加入S6管，渦旋混勻5秒

　　倍比稀釋?

　　從S6管取500μL加入S5管，混勻

　　重復(fù)上述步驟至S1管，S0管僅含稀釋液(空白對(duì)照)

　　關(guān)鍵點(diǎn)：每次稀釋需充分混勻，避免濃度誤差

　　特殊處理?

　　高濃度標(biāo)準(zhǔn)品(如血清樣本)需酸化處理：加鹽酸20μL混勻，孵育10分鐘后加氫氧化鈉20μL終止

　　三、稀釋后操作?

　　分裝與保存?

　　現(xiàn)配現(xiàn)用，避免反復(fù)凍融

　　分裝體積建議：50μL/孔(酶標(biāo)板使用)

　　質(zhì)量控制?

　　檢查各管液體混勻狀態(tài)，避免沉淀

　　酸化樣本需20倍稀釋后使用