如何避免在使用：ATTO 425琥珀酰亞胺酯（ATTO 425-NHS）時的常見問題？

【試劑描述】

Atto 425作為一種藍光激發的熒光染料，配備有NHS（N-羥基琥珀酰亞胺）活性酯基團，能夠與胺基（像蛋白質、抗體以及肽鏈里的賴氨酸殘基所含的胺基）產生共價結合反應。Atto 425 NHS Ester的分子結構里包含NHS活性酯基團，該基團可在溫和條件下與初級胺特異性反應，進而生成穩定的酰胺鍵。這種借助化學手段進行修飾的方法，在標記蛋白質、多肽以及其他含氨基的生物分子方面應用廣泛。

【試劑信息】

中文名稱：ATTO 425琥珀酰亞胺酯、ATTO 425-N-羥基琥珀酰亞胺酯

英文名稱：ATTO 425 NHS ester；ATTO 425 SE；ATTO 425-NHS；

CAS號：892156-28-4

分子式：C??H??N?O?

分子量：498.52

純度：≥95%

外觀：藍色固體/粉末

溶解性：可溶于DMSO、DMF、乙醇及水溶液（需避光）

結構式：

安全性：

操作時需佩戴防護裝備，避免接觸皮膚和眼睛。

如不慎接觸，請立即用大量清水沖洗，并尋求醫療幫助。

【應用范圍】

蛋白質與抗體標記：借助NHS酯和蛋白質賴氨酸殘基上的胺基發生共價結合反應，實現熒光標記抗體的制備。

細胞成像：對細胞表面蛋白或細胞內蛋白進行標記，以便利用熒光顯微鏡開展觀察工作。

流式細胞術：充當熒光探針，用于分析細胞群體特征。

免疫熒光分析：提升檢測的靈敏度以及信號的特異性。

分子相互作用研究：作為示蹤劑，用于開展結合動力學和空間分布方面的研究。

【使用注意事項】

此試劑對水分較為敏感，保存時需避光、保持干燥，并置于低溫環境中冷藏。標記反應要在堿性緩沖液（pH約7.5 - 8.5）里進行，以此確保胺基的活性。標記結束后，要及時去除未參與反應的游離染料，降低背景信號干擾。進行活細胞標記時，要留意細胞毒性問題，并優化染料濃度。

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該試劑僅用于科研實驗，不可用于人體