人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒的使用注意事項主要包括以下幾點:
一、樣本處理與保存
1、血清或血漿樣本需使用無熱原試管采集,離心后分離上清液,避免溶血。
2、樣本需在2-8℃避光保存,長期保存建議-20℃或更低溫度,避免反復凍融。
3、腦脊液等特殊樣本需按特定方法處理,確保無顆粒殘留。
二、檢測前準備
1、試劑盒需提前20分鐘從冰箱取出,平衡至室溫后再使用。
2、標準品需按濃度梯度稀釋(如320、160、80、40、20、0pg/mL),確保線性范圍覆蓋樣本預期值。
三、操作規范
1、使用雙抗體夾心法ELISA時,需嚴格按步驟加入樣本、標準品及酶標抗體,溫育時間需充分。
2、顯色反應后需及時終止,并在450nm波長下測定吸光度,避免延遲導致結果偏差。
四、質量控制
1、重復性要求板內、板間變異系數均小于15%,標準品線性回歸R值需≥0.9600。
2、高濃度樣本需用稀釋液調整后復測,確保結果在檢測范圍內。
五、特殊注意事項
1、單分子免疫熒光法(如Simoa®技術)需配套專用設備,操作需遵循廠商指南。
2、磷酸化蛋白易降解,全程需保持低溫,并添加磷酸酶抑制劑。
若需進一步了解不同檢測方法(如ELISA與單分子技術)的差異,可參考相關技術指南。